美国NanoView公司所开发的全自动外泌体荧光检测分析系统是一款无需纯化的、全自动的可对单个外泌体进行表征分析的全新设备。该设备能够提供外泌体表征信息，包括外泌体粒径大小、计数、分布、携带蛋白表达、生物标志物（CD9，CD81，CD63等）共定位等。操作简单，结果可靠。一经推出，便引起了外泌体领域科研工作者的广泛关注，短短两年时间在已有50多个实验室采用该技术，发表重要文献近百篇。
全自动外泌体荧光检测分析系统的基本原理是一种基于特异性免疫捕获技术，允许研究者直接分析特定群体的外泌体或外囊泡。通过配套的试剂盒，客户一次性能够分析多达9个不同的样本，大大节省了时间和经济成本。全自动外泌体荧光检测分析系统兼容各种生物样本，除了纯化的外泌体之外，对于血液、尿液、恶性肿瘤、腹水中的外泌体也可直接检测分析，大大拓展了研究范围。
ExoView R200参数信息:
- 颗粒大小分辨范围：大于50 nm（可分析大于40 nm的病毒颗粒）
- 荧光粒径分辨范围：大于20 nm
- 所需样本体积：25 μL
- 激发波长：410 nm，488 nm，555 nm，640 nm
- 可一次检测16个样本，每个样本可同时检测6个不同亚型及3种生物标记的荧光定位
- 单个样品检测时间：8分钟
- 捕获抗体：一个芯片多允许6种捕获抗体（+阴性对照）
- 荧光通道：3个荧光通道
应用方向及主要特征
生物标记物共定位 可量化4种标记物的表达情况 | 计数分析 直接从样品中计算抗原阳性外泌体的数量，无需提纯 |
粒径分析 高精度统计外泌体的颗粒大小及分布 | 检测外泌体内容物 使用ExoView Cargo试剂盒可探测外泌体内部核酸的装载情况，分析装载率 |
荧光检测 具备3个荧光通道，能够探测单个蛋白的结合 | 线性工作流程 9个样品的全自动分析 |
无须纯化 无需担心纯化带来的误差，更的测量样品间表征和表达信息的差异 | 多重样本分析 可使用6种表面标记物来筛选外泌体 |
粒径分析
全自动外泌体荧光检测分析系统能够对>50 nm的外泌体进行全方面的表征，无论是粒径尺寸、粒径分布还是外泌体的亚型均可在一次测试中得到。并且所用来测试的样本无需进行纯化，避免因纯化带来的样本偏差。
分析不同大小和不同尺度的外泌体亚群，在CD171过表达系统中，100 nm以上的外泌体仅表达了CD171。
量化外泌体亚群
通过抗体捕获的模式，全自动外泌体荧光检测分析系统能够量化含有不同标记物的外泌体亚群，并对不同种群的外泌体进行特异性计数和分析。整个过程无需纯化，并且线性范围可跨越3个数量。
TSPAN8阳性细胞外囊泡的稀释曲线。使用1:3比例的梯度稀释。用R2 = 0.9986计算与TSPAN8荧光数据的线性拟合。
检测外囊泡中的装载物
MISEV建议在表征外泌体和外囊泡时，应当同时测量表面和载体蛋白。使用ExoView芯片可穿透外泌体，探测膜内蛋白和载体。并且单次可定量3种表面、管腔蛋白。
检测细胞外泌体内的Syntenin。
WT细胞在未穿膜的条件下几乎观测不到Syntenin的信号。进行穿膜处理后可以观测到Syntenin信号，而KO之后信号消失
生物标志物共定位
全自动外泌体荧光检测分析系统能够在单个外泌体样本上检测多达4种标记物，并同时提供外泌体的其它表征数据诸如计数、颗粒尺寸统计等。
无需纯化
全自动外泌体荧光检测分析系统只测量含有靶标抗原的特定细胞外泌体群体。仅需35ul的稀释样品，即可直接获得外泌体的表型、l粒径和计数信息。并且无需担心污染物对测试的影响。
无论纯化与否，Exoview均可进行分析
全自动外泌体荧光检测分析系统 Kit 配置清单:
ExoView Tetraspanin Kits | CD9 - 捕获抗体 CD63 - 捕获抗体 CD81 - 捕获抗体 Mouse IgG 阴性对照 CD9、CD63、CD81三色共标记荧光抗体。 |
ExoView Tetraspanin Plasma Kits | CD9 - 捕获抗体 CD63 - 捕获抗体 CD81 - 捕获抗体 CD41a - 捕获抗体 多达三种定制化捕获抗体 同种阴性对照 CD9、CD63、CD81三色共标记荧光抗体。 |
ExoView Tetraspanin Custom Kits | CD9 - 捕获抗体 CD63 - 捕获抗体 CD81 - 捕获抗体 多达三种定制化捕获抗体 同种阴性对照 CD9、CD63、CD81三色共标记荧光抗体。 |
ExoView Cargo Kits | 兼容所有ExoView Kit 标准 CD9, CD63和CD81 捕获抗体 Mouse IgG 阴性对照 ExoView Cargo 试剂 CD9、CD63、CD81三色共标记荧光抗体。 Sytenin荧光抗体 |
用户单位
中国用户已发表文章
? 南京大学李靓/张辰宇/张玉婧课题组在《Frontiers in Cell and Developmental Biology》发表文章。
南京大学李靓/张辰宇/张玉婧课题组在《Frontiers in Cell and Developmental Biology》发表文章。
? 上海大学在《Journal of extracellular vesicles》发表文章。
? 中国科学院深圳技术研究院在《Lab on a Chip》发表文章。
? 北京天坛医院、纳米科学中心、北京航空航天大学在《Advanced Science》发表文章。
?同济大学附属上海市肺科医院、上海思路迪转化医学在《Journal of Nanobiotechnology》发表文章。
? 山东千佛山医院在《NANO LETTERS》发表文章
感谢用户老师对Quantum Design China & NanoView设备的认可与支持！
2022-2023发表文章
? Richard J. R. Kelwick …& Paul S. Freemont. (2023) Opportunities to accelerate extracellular vesicle research with cell-free synthetic biology. Journal of Extracellular Vesicles.
? Laurence Blavier …& Yves A. DeClerck. (2023) The capture of extracellular vesicles endogenously released by xenotransplanted tumours induces an inflammatory reaction in the premetastatic niche. Journal of Extracellular Vesicles.
? Hongyun Wang ……& Junjie Xiao. (2022) Extracellular vesicles enclosed-miR-421 suppresses air pollution (PM2.5)-induced cardiac dysfunction via ACE2 signalling. Journal of Extracellular Vesicles.
? Linglei Jiang……& Santosh Dhakal. (2022) A7 bacterial extracellular vesicle-based intranasal vaccine against SARS-CoV-2 protects against disease and elicits neutralizing antibodies to wild-type and Delta variants. Journal of extracellular vesicles.
? Shaobo Ruan, Nina Erwin, Mei He. (2022) Light-induced high-efficient cellular production of immune functional extracellular vesicles. Journal of extracellular vesicles.
? Nasibeh Karimi ……& Cecilia L?sser. (2022) Tetraspanins distinguish separate extracellular vesicle subpopulations in human serum and plasma – Contributions of platelet extracellular vesicles in plasma samples. Journal of Extracellular Vesicles.
? Heikki Kyykallio ……& Pia R-M Siljander. (2022) A quick pipeline for the isolation of 3D cell culture-derived extracellular vesicles. Journal of Extracellular Vesicles.
? Roberto Frigerio ……& Marina Cretich. (2022) Comparing digital detection platforms in high sensitivity immune-phenotyping of extracellular vesicles. Journal of Extracellular Vesicles.
? Yael Hirschberg ……& Inge Mertens. (2022) Characterizing extracellular vesicles from individual low volume cerebrospinal fluid samples, isolated by SmartSEC. Journal of Extracellular Vesicles.
? Sukhbir Kaur……& David D. Roberts. (2022) Single vesicle analysis of CD47 association with integrins and tetraspanins on extracellular vesicles released by T lymphoblast and prostate carcinoma cells. Journal of Extracellular Vesicles.
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? Gi Beom Kim …& In-San Kim. (2023) Harnessing Oncolytic Extracellular Vesicles for Tumor Cell-Preferential Cytoplasmic Delivery of Misfolded Proteins for Cancer Immunotherapy. Small.
? J. Klein, Y. Cao. (2023) Multi-Lipid Synergy In Cartilage Lubrication: Redundancy Or Evolution? Osteoarthritis and Cartilage.
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? Mei Lu …& Yuanyu Huang. (2023) Antitumor synergism between PAK4 silencing and immunogenic phototherapy of engineered extracellular vesicles. Acta Pharmaceutica Sinica B.
? Luke C. McIlvenna ……& Martin Whitham. (2023) Single vesicle analysis reveals the release of tetraspanin positive extracellular vesicles into circulation with high intensity intermittent exercise. The Journal of Physiology.
? Joseph Blommer ……& Dimitrios Kapogiannis. (2023) Extracellular vesicle biomarkers for cognitive impairment in Parkinson’s disease. BRAIN.
? Tyler J ……& Atta Behfar. (2022) Exosome biopotentiated hydrogel restores damaged skeletal muscle in a porcine model of stress urinary incontinence. Npj Regenerative Medicine.
? Min Han ……& Tao Xin. (2022) Three-Dimensional-Cultured MSC-Derived Exosome-Hydrogel Hybrid Microneedle Array Patch for Spinal Cord Repair. Nano Letters.
? Zijian Yang ……& David A. Issadore. (2022) Ultrasensitive Single Extracellular Vesicle Detection Using High Throughput Droplet Digital Enzyme-Linked Immunosorbent Assay. Nano Letters.
