一种pPIC9?ompA?Fc重组质粒、构建方法、在毕赤酵母表达系统中的诱导表达及其应用

　　摘要：本发明提供了一种pPIC9?ompA?Fc重组质粒、构建方法、表达及其应用，属于基因工程技术领域，以禽波氏杆菌DNA及以鸡脾脏mRNA为模版合成的cDNA为模版，通过PCR分别获得ompA?linker基因和鸡IgY?Fc?linker基因，再将两份PCR产物进行SOE?PCR得到ompA?linker?Fc融合基因，将融合基因连接至PMD18?T克隆质粒，连接转化后对重组质粒进行测序，双酶切并连接至表达质粒pPIC9中，将连接产物转化受体菌，最后鉴定阳性转化子，获得pPIC9?ompA?Fc融合质粒。本发明成功克隆禽波氏杆菌ompA及鸡IgY?Fc，并将两种基因成功融合至表达质粒，实现了重组质粒毕赤酵母高效表达，成本低廉，增强了融合蛋白的活性。

专利类型发明专利
申请人山东农业大学;
发明人朱瑞良;魏凯;胡莉萍;董雯雯;黄河;刘丽萍;李鑫;于翠莲;张浩;
地址271018 山东省泰安市泰山区岱宗大街61号
申请号CN201610717365.5
申请时间2016年08月24日
申请公布号CN106222192A
申请公布时间2016年12月14日
分类号C12N15/81(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61K39/10(2006.01)I;A61P31/04(2006.01)I;