摘要：本发明公开了一套检测小鼠肠道分节丝状菌SFB鞭毛蛋白的方法与应用，包括PCR方法、蛋白质变性电泳与免疫印迹方法(SDS?PAGE?Western?blotting)、细菌原位杂交结合免疫组化方法(FISH+IHC)。所述PCR方法为，设计合成了一对能特异性扩增SFB鞭毛蛋白Flic3基因的引物，使用该引物对样品DNA进行PCR扩增后，可以在凝胶电泳后检测到与Flic3基因片段大小一致的DNA条带。所述蛋白质变性电泳与免疫印迹方法为，成功制备了兔抗SFB?Flic3鞭毛蛋白的多克隆抗体，并可以使用该蛋白对样品中是否存在SFB?Flic3鞭毛蛋白进行检测。所述细菌原位杂交结合免疫组化方法为使用SFB16S?rRNA基因特异常性探针和兔抗SFB?Flic3鞭毛蛋白多克隆抗体检测SFB鞭毛蛋白的表达情况、SFB细菌的形态及SFB与肠上皮的相互作用情况。本发明所涉及的检测方法具有快速、直观和表象的优点。
- 专利类型发明专利
- 申请人浙江大学;浙江省农业科学院;
- 发明人陈华海;尹业师;王欣;项春生;
- 地址310012 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
- 申请号CN201610579365.3
- 申请时间2016年07月19日
- 申请公布号CN106011281A
- 申请公布时间2016年10月12日
- 分类号C12Q1/68(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I;G01N27/62(2006.01)I;
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