摘要:本发明公开了一种用于表达T4连接酶的家蚕中部丝腺生物反应器双启动子通用型质粒及其应用与方法。质粒以piggyBac转座子为基础并带有Amp抗性基因,包含有作为外源基因的T4连接酶基因和作为标记基因的绿色荧光EGFP基因的功能表达框,质粒用分子生物学方法构建,且DDDDK与丝素轻链基因polyA之间含有ApaI和NheI专一性的两个酶切位点,采用ApaI和NheI双酶切通用型质粒,与T4连接酶基因连接后,与辅助质粒共同注射到家蚕受精卵内,利用转座子特性使绿色荧光蛋白基因和T4连接酶基因导入到家蚕基因组内,并稳定遗传和表达,获得转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕,利用该家蚕丝腺细胞特异地合成分泌T4连接酶蛋白。
- 专利类型发明专利
- 申请人浙江大学;
- 发明人钟伯雄;张玉玉;叶露鹏;
- 地址310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号
- 申请号CN201610296590.6
- 申请时间2016年05月04日
- 申请公布号CN105907786A
- 申请公布时间2016年08月31日
- 分类号C12N15/85(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;A01K67/04(2006.01)I;