摘要：本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种分子标记猪瘟病毒弱毒疫苗的构建方法。本发明以含有猪瘟病毒疫苗C株基因组5’半长的重组质粒pA?F123和含有BVDV?VEDEVAC株Erns基因的重组质粒pE?B?Erns为模板，在两端设计20bp同源片段，使用一步定向克隆试剂盒，获得重组pA?B?Erns?F123质粒；用BamH?I和Sal?I将含有猪瘟病毒疫苗C株基因组3’半长的F456片段从重组质粒pB?F456中切下，克隆于相同酶作用的pA?B?Erns?F123中，获得重组质粒pA?B?Erns?FL。本发明的反向遗传操作技术的建立为研究CSFV基因功能和新型疫苗开辟了新的途径。利用反向遗传操作技术将外源标签插入病毒基因组可以用来研究病毒的复制、病毒编码蛋白的功能及抗病毒药物的筛选，使用RNA聚合酶Ⅱ系统能够高效和稳定地拯救猪瘟病毒感染性cDNA克隆。
- 专利类型发明专利
- 申请人浙江大学;
- 发明人方维焕;廖迅;李肖梁;
- 地址310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
- 申请号CN201610224932.3
- 申请时间2016年04月12日
- 申请公布号CN105886531A
- 申请公布时间2016年08月24日
- 分类号C12N15/85(2006.01)I;C12N15/40(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;A61K39/187(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;
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京公网安备11010802043465号
