摘要:本发明公开了一种鸡生长激素重组蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法,包括以下步骤:(1)从鸡垂体中提取总RNA并做反转录PCR得到其cDNA,以cDNA为模板,PCR得到鸡生长激素的基因片段;(2)利用毕赤酵母构建重组表达载体pPIC9K-cGH;(3)重组表达载体pPIC9K-cGH电转化毕赤酵母GS115,筛选得到转基因重组酵母菌株GS115-pPIC9K-cGH;(4)通过甲醇诱导表达,并纯化得到鸡生长激素重组蛋白,通过细胞活性试验鉴定其活性。本发明首次实现鸡生长激素(cGH)重组蛋白在毕赤酵母中的高效表达,并建立了纯化体系,可得到纯度较高的具有活性的鸡生长激素重组蛋白。该方法操作简便、产量高、成本低廉,为进一步研究鸡生长激素的结构、功能以及生产应用提供了基础。
- 专利类型发明专利
- 申请人常熟理工学院;
- 发明人郁建锋;顾志良;何赛;张艳萍;金泽楷;周欢庆;姚丽娟;
- 地址215500 江苏省苏州市常熟市南三环路99号
- 申请号CN201610091768.3
- 申请时间2016年02月19日
- 申请公布号CN105695500A
- 申请公布时间2016年06月22日
- 分类号C12N15/81(2006.01)I;C07K14/61(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N;