摘要:本发明公开了一种构建酵母多拷贝表达载体的方法,首先选取具有目标基因的第一载体和第二载体,然后利用一对同尾酶和一个参考酶对第一载体和第二载体进行酶切,获得具有目标基因的子序列和母序列,获得具有参考片段的目标载体,最后利用参考片段进行快速筛选,获得所述多拷贝表达载体。通过本发明,能快速准确的构建含有特定拷贝数和特定基因的多拷贝数载体,降低了常规构建多拷贝表达载体方法中表达盒连接方向随机、载体直连或者酶切过程不充分等产生假阳性因素的概率,操作简单,效率高。
- 专利类型发明专利
- 申请人华中科技大学;
- 发明人闫云君;焦梁成;潘笃杰;查根晗;周清华;徐莉;
- 地址430074 湖北省武汉市洪山区珞喻路1037号
- 申请号CN201610172061.5
- 申请时间2016年03月24日
- 申请公布号CN105647959A
- 申请公布时间2016年06月08日
- 分类号C12N15/81(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N;