摘要：本发明涉及针对小鼠STAT3基因，构建抑制效率最佳的STAT3shRNA慢病毒干扰载体。针对STAT3基因设计4对shRNA，克隆到慢病毒干扰载体pLenti中，构建出干扰载体PLKO.1-STAT3-shRNA-a1、a2、a3或a4，与包装外壳蛋白质粒?(pVSV-g)?和包膜质粒(Pax-2)共转染293T细胞，上清培养液过滤后到病毒悬液，测定病毒滴度后以一定MOI病毒量感染大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞，筛选最佳抑制效率的shRNA干扰载体。PLKO.1-STAT3-shRNA-a1、a2、a3或a4经限制性酶切和测序证明基因插入正确，Westernblot法证实PLKO.1-STAT3-shRNA明显降低细胞内STAT3蛋白的表达。
- 专利类型发明专利
- 申请人上海同科生物科技有限公司;
- 发明人施佳萍;杨艳菊;
- 地址200092 上海市杨浦区赤峰路65号同济大学科技园805室
- 申请号CN201310370286.8
- 申请时间2013年08月23日
- 申请公布号CN104419731A
- 申请公布时间2015年03月18日
- 分类号C12N15/867(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;
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京公网安备11010802043465号
