摘要:本发明涉及一种大肠杆菌工程菌,本发明还提供一种大肠杆菌工程菌的制备方法,步骤是克隆黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶的基因的cDNA,双酶切上述cDNA,将酶切片段连接pCold-TF载体,鉴定得到的质粒pCold-TF-LiP是否阳性表达,将阳性质粒pCold-TF-LiP导入至大肠杆菌BL21感受态细胞中,获得表达木质素过氧化物酶的大肠杆菌工程菌,本发明还提供大肠杆菌工程菌的应用,方法是将大肠杆菌工程菌接种于液体培养基,液体培养基中加入氨苄青霉素,培养至OD600为0.58~0.62,加入蛋白诱导剂IPTG,诱导重组蛋白表达,本发明的大肠杆菌工程菌表达量高,活性极强,酶活为3528?U/L。
- 专利类型发明专利
- 申请人湖南大学;
- 发明人陈明;晏铭;曾光明;杜长青;张嘉超;鲁伦慧;朱艺;赖萃;许飘;武海鹏;
- 地址410082 湖南省长沙市河西岳麓山湖南大学环境科学与工程学院
- 申请号CN201310544399.5
- 申请时间2013年11月06日
- 申请公布号CN103540606B
- 申请公布时间2015年09月23日
- 分类号C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N9/08(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N;