摘要:本发明公开了一种牛脂肪酸转运蛋白1基因启动子荧光素酶质粒的构建方法。首先通过分子克隆方法克隆获得包含牛FATP1基因第一外显子的5’侧翼启动子序列,亚克隆至pMD19-T-Promoter载体,再利用KpnI和XhoI限制性内切酶双酶切后,将其产物纯化回收,并连接在pGL3-Basic质粒上,转化大肠杆菌JM109,挑取鉴定后的阳性克隆子,进行大量制备和保藏。此法构建的包含牛FATP1基因第一外显子的5’侧翼启动子的荧光素酶质粒(pGL3-Basic-Promoter),可转染细胞,进行启动子功能活性分析,以筛选出高效的组织特异性启动子,克服目前动物基因工程中可利用的组织特异性启动子数目的不足及调控能力较弱的缺陷。
- 专利类型发明专利
- 申请人贵州大学;
- 发明人许厚强;龚婷;陈伟;陈祥;赵佳福;
- 地址550025 贵州省贵阳市花溪区贵州大学北校区科学技术处
- 申请号CN201310340744.3
- 申请时间2013年08月07日
- 申请公布号CN103509811A
- 申请公布时间2014年01月15日
- 分类号C12N15/66(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;