摘要:本发明提供一种适用于猪瘟病毒C株弱毒疫苗脾淋源和细胞源病毒含量定量检测的荧光定量PCR快速诊断试剂盒及其制备方法。102拷贝/μL的总RNA即能得到特异性扩增,在107~102拷贝/μL线性范围内有良好的扩增曲线,适用于猪瘟弱毒疫苗成品及半成品的效价估测。本发明所使用的猪瘟病毒特异引物是在其高度保守的5’端非编码区(5’-UTR)设计合成的2条引物:P1(5′-GCAGAAGCCCACCTCGAGAT-3′)为猪瘟病毒特异性上游引物,P2(5′-TACACCGGTTCCTCCACTCC-3′)为猪瘟病毒特异性下游引物,预期扩增产物245?bp,荧光定量PCR反应呈现特征性S形扩增动力曲线,熔解曲线分析显示出现单特异峰。该方法只能检测CSFV,不与BVDV发生交叉反应。
- 专利类型发明专利
- 申请人山东绿都生物科技有限公司;
- 发明人沈志强;李安;谢金文;王金良;郭显坡;
- 地址256600 山东省滨州市黄河二路169号
- 申请号CN201110152527.2
- 申请时间2011年06月08日
- 申请公布号CN102816863A
- 申请公布时间2012年12月12日
- 分类号C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N;