高通量测序（NGS）应用科普

　　高通量测序技术在肿瘤基因检测中应用广泛。一方面通过基因测序可以找出癌症的突变基因，从而迅速确定对症药物；另一方面，样本类型可以是患者的血液甚至唾液，无需传统的病理切片，减少诊断过程中对患者机体的损伤。下面我们来简单介绍NGS在肿瘤样本基因检测应用中的流程

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　　_{1、样本接收与质量控制}

　　血浆样本要求：

　　用于ctDNA检测的血液采集量必须在8ml以上，使用专业的BunnyTube^TM游离DNA样本保存管室温保存运输到中心实验室。

　　肿瘤石蜡样本（FFPE）要求：

　　①整个福尔马林固化石蜡包埋组织蜡块；②组织大小>0.5*0.5cm，切出5-10张未染色处理过的石蜡组织，厚度2-5μm；③组织大小<0.5*0.5cm，需10-15张，制成切片或直接保存到1.5mlEP管内肿瘤细胞含量不低于10%，坏死组织不大于70% 。玻片盒上要标明姓名、出生日期和采集日期，常温保存即可。

　　2、样本DNA提取与破碎

　　针对不同样本类型运用不同提取试剂盒，提取所需DNA，并通过超声波破碎方法，使大分子片段的DNA行成一定长度范围内的短序列片段。

　　3、文库构建与富集

　　文库构建：将提前准备好的接头添加到提取到的DNA片段中，然后通过DNA分选与纯化试剂盒，去除不符合要求的大、小DNA片段以及多余的接头及其他杂质。

　　文库富集：通过加入阻断寡核苷酸--分子杂交（加入探针与目标杂交捕获）--吸附探针（加入磁珠从而吸附探针）--磁沉降（用磁铁捕获目标片段，洗脱掉off-target片段），实现目标DNA片段的选择。

　　4、高通量测序

　　5、生信分析与报告生成

　　样本数据下机后，计算中心根据不同实验项目的要求，对数据使用不同的分析，计算方法进行分析。再根据生信信息分析的结果生成一份具体的报告，以便医生解读。

　　兔牙生物科技产品专为NGS开发设计，广泛应用于肿瘤基因检测，产前筛查及宏基因组测序。