显色剂(在30℃温度下培养15分钟),将100微升底物摇匀倒入比色皿中即可放入仪器。
当抑制率≥50%时,表示蔬菜中有机磷或氨基甲酸酯类农药超过国家标准,抑制率≥50%的样品需要重复检验2次以上。
空白对照测试:
第一步:按下“校准”键。
第二步:打开仪器门盖,将装有对照液的比色皿放入指定的通道中,盖好仪器盖,按下“空白”键,仪器进行空白检测倒计时。
第三步:空白对照检测结束后,仪器自动显示空白样品对照测试结果Ao,打开仪器盖取出对照。
样品测试;
第一步:按下“校准”键。
第二步:打开仪器门盖,将装有样品液的比色皿放入指定的通道中,盖好仪器盖,按下“检测”键,仪器进行样品检测倒计时。
第三步:检测结束后,仪器自动显示指定通道农药残留检测样品的测试结果Ai,仪器自动保存对照对照值和检测结果,打开仪器盖取出样品。
【注】样品的抑制率在40%--50%之间为可疑农残超标样品,若重复数次后抑制率仍大于50%为农残超标样品,表明被测样品的农药残留可能超过安全的界定标准,建议用气象色谱等仪器做进一步的检测。
检测结果打印:在显示农药残留检测结果的界面,按“打印”键,仪器开始打印。
2.结果判定
结果以酶被抑制的程度(抑制率)表示。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时,表示蔬菜中含有有机磷或氨基甲酸酯类农药存在。抑制率≥50%的样品需要重复检测2次以上。
对抑制率≥50%的样品,可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。
3.酶抑制法技术指标
(1)灵敏度指标
酶抑制率法的最低检测限应达到以下指标:甲胺磷0.8mg/L,敌百虫0.25mg/L,呋喃丹0.002mg/L。
(2)符合率
在检出的抑制率≥50%的10份以上样品中,经气想色谱法验证,符合率应在80%以上。
特别提示:
1.仪器重新开机后,必须重新制作空白数值。
2.试剂的保存及注意事项
本试剂适用的国家标准为:GB/T5009.199-2003。
请在冻干状态时用冷冻的方式保存,而溶液状态时用冷藏的方式保存。具体保存期限如下:
试剂保存期限
及方式
|
冻 干 剂
|
溶 液 剂
|
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常温放置
|
冷冻保存
(-20℃以下)
|
常温放置
|
冷藏 (4℃)
|
|
酶液
|
1~2周
|
一年
|
2~4天
|
7~10天
|
底物
|
1~2周
|
一年
|
2~4天
|
7~10天
|
显色剂
|
避光保存 一年
|
避光保存 半年
|
||
提取液
|
无期限
|
无期限
|
3.韭菜、生姜、葱、蒜、辣椒、胡罗卜等蔬菜中,含有破坏酶活性的物质,处理这类样品时,不要剪的太碎、浸提时间过长,必要时可采取整株蔬菜浸提。
4.农药浓度与抑制率对照表
(实验条件:37℃)
甲胺磷
|
浓度(μg/ml)
|
0.4
|
0.8
|
1.6
|
|
|
|
抑制率
|
35.0
|
52.0
|
69.0
|
|
|
|
|
氧乐果
|
浓度(μg/ml)
|
0.4
|
0.6
|
0.8
|
1.2
|
1.6
|
3.75
|
抑制率
|
26.4
|
29.4
|
36.7
|
52.7
|
59.6
|
76.3
|
|
敌百虫
|
浓度(μg/ml)
|
0.1
|
0.15
|
0.2
|
0.25
|
0.4
|
0.5
|
抑制率
|
13.6
|
22.9
|
37.2
|
50.6
|
63.9
|
73.9
|
|
呋喃丹
|
浓度(μg/ml)
|
0.001
|
0.002
|
0.003
|
0.004
|
0.006
|
0.008
|
抑制率
|
25.2
|
50.3
|
|