关于胶囊铬超标事件的检测方法
适应范围：
本指导原则由APL微波消解仪厂家提供：适用于2012年明胶药用空心胶囊壳中铬检测的应急检验。
1、检验样品：
胶囊剂(由明胶、空心胶囊壳装载的胶囊)。
2、检验项目：
明胶空心胶囊中的铬。
3、检验方法：
《中国药典》2010年版(二部)明胶空心胶囊项下铬检查项(P1204)、附录IV D 原子吸收分光光度法(附录24)、附录I E 胶囊剂装量差异项。
4、仪器
4.2电子天平
4.3 微波消解仪
4.4 电热板或其他赶酸设备，如：恒温消解仪、赶酸器等。
5、试剂
5.1 硝酸(优级纯)
5.2 铬单元素标准溶液(1000μg/ml，国家标准物质)
6、空心胶囊壳的制备：
倾出胶囊剂的内容物，胶囊壳用棉棒或小刷试净(不得损坏囊壳)，放置，待用。
7、胶囊剂中明胶空心胶囊壳中总铬测定方法：
7.1铬标准贮备液的制备：取铬单元素标准溶液(1000μg/ml)，用2%硝酸稀释制成每1ml含铬1.0μg的铬标准贮备液。
7.2标准溶液的制备：分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬0~80ng的对照品溶液。临用时现配。
7.3供试品溶液的制备：精密称取本品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸5~10ml，混匀，浸泡过夜，盖上内盖，旋紧外套，置适宜的微波消解。消解完全后，取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸汽挥尽并近干，用2%硝酸转移至50ml量瓶中，并加2%硝酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液;同法制备试剂空白溶液，作为空白校正。
7.4 测定： 取供试品溶液与对照品溶液适量，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度法(《中国药典》2010年版(二部)附录IV D第一法)，在357.9nm的波长处测定，计算，即得。
8、方法验证：
8.1 线性：制备含铬的对照品溶液至少5份，浓度依次递增，最高浓度吸收值应在0.8以下，保证具有较好的线性范围，相关系数(r)≥0.99。
8.2 准确性：应进行整个实验过程的(包括前处理)方法学回收率验证，暂定回收率应为80%-120%的范围内。每次测定需进行随行回收试验。
8.3 重复性
取限度浓度的标准品溶液重复测定5次，吸收度(测定值)的变化范围(RSD)不得过5%。
8.4 定量限
本方法定量限应不低于0.5mg/kg。
9、注意事项：
9.1微波消解：样品前处理是试验中的关键步骤，既要保证消解完全，又要保证消解过程样品中的铬不损失，因此试验中建议加入10ml硝酸(优级纯)，并需要浸泡过夜后消解。参考消解程序为：5min由室温升至120℃，维持3min;6min由120℃升至150℃，维持2min;6min由150℃升至180℃，维持20min。
9.2为避免玻璃容器的干扰，试验中宜采用塑料容量瓶(聚丙烯材质)定容。
9.3不同原子吸收仪试验参数可能不同，可根据原子吸收仪说明书中推荐程序设 定测定参数(参考石墨炉升温程序如下：5s升温至100℃，保持10s;5s升温至500℃，保持10s;0s升温至2100℃，保持3s;0s升温至2200℃，保持2s)
9.4含TiO2的胶囊壳(不透明胶囊)建议在微波消解时，样品中除加硝酸外可另加0.5ml氢氟酸，其他同供试品溶液制备。
9.5实验用水：应采用纯化水，储藏水的容器宜用聚丙烯塑料材料制成，不宜选用玻璃容器长期储存。
9.6 试剂应采用优级纯及以上级别试剂。
9.7试验中所用容器及器皿均需在每次使用前用盐酸溶液(浓盐酸：水/1:1)浸泡1h，再用硝酸溶液(浓硝酸：水/1:1)浸泡1h，再用纯化水冲洗干净后使用。微波消解容器应采用仪器清洗程序清洗，不得采用铬酸清洗液洗涤容器。
9.8可供选择的铬元素标准溶液(1000μg/mL)由国家有色金属及电子材料分析测试中心提供(电话：010-82241362;传真：010-82241346);也可以由中国计量科学研究院提供(电话：010-64525678-4703)。铬对照贮备溶液应密封，冷暗处保存。
9.9 结果判断：标准规定不得过百万分之二(2mg/kg)。由于微量测定，结果的偏差会较大，一般两份样品的相对偏差≤10%，取平均值即可。
9.10 样品检测应严格遵守《中国药典》2010年版(二部)“明胶空心胶囊”铬项下方法试验，如因试验需要改变样品前处理方法及检测波长，应按照实验室有关质量管理程序(偏离)进行。
9.11若试剂空白溶液测定值过高(宜不超过标准曲线最低浓度点吸光度值的50%)，应换用空白干扰小的溶液重新试验。
9.12 注意试验所需的所有仪器均应在计量检定合格效期内。
9.13若供试品溶液浓度过高，可稀释到标准曲线范围内进行测定。
9.14 由于硬、软胶囊壳中含有不同比例的甘油(软胶囊比例较高，甘油：明胶比例可达1:2)，在进行微波消解时，甘油可与硝酸产生反应，容易爆罐，请注意消解时的安全监控，尽量在前处理时预消解。
